Según el temario establecido en el Anexo I del Real Decreto 542/2016, de 25 de noviembre, sobre normas de sanidad y protección animal durante el transporte:

1. Normativa de la UE en materia de protección de los animales durante el transporte, en particular los artículos 3 y 4 y los anexos I y II del Reglamento 1/2005, del Consejo, de 22 de diciembre de 2004
2. Normativa de ámbito nacional y ámbito autonómico sobre protección de animales durante el transporte. Documentación administrativa
3. Fisiología de los animales, necesidades de comida y agua, comportamiento animal y concepto de estrés.
4. Aspectos prácticos del cuidado y manejo de animales.
5. Efectos y repercusiones de modo y práctica de conducción sobre el bienestar de los animales.
6. Aptitud para el transporte de los animales.
7. Cuidados de emergencia a los animales
8. Criterios de seguridad para el personal que trabaja con animales.
9. Aspectos de seguridad vial relacionados con el transporte de animales y actuación en caso de accidente.
10. Limpieza y desinfección de los medios de transporte y contenedores